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双分子荧光互补BIFC


BIFC
 
一、技术介绍:
双分子荧光互补 (Bimolecular Fluorescence Complementation, BiFC)是一项可直观、快速判断目标蛋白在活细胞中的定位和相互作用的新技术。该技术巧妙地将荧光蛋白分割成两个不具有荧光活性的分子片段(N-fragment,C-fragment)。这些片段在体内体外混合时,不能自发地组装成完整的荧光蛋白,也不能激发出荧光。将待研究的两个目标蛋白分别与这2个荧光蛋白片段连接融合,如果两个目标蛋白有相互作用,则荧光蛋白片段在空间上互相靠近互补,重新构建成完整的具有活性的荧光蛋白分子,在该荧光蛋白的激发光激发下,发射荧光。反之,若蛋白之间没有相互作用,则不能被激发出荧光。
应用:
a. 适用于体内和体外蛋白相互作用的研究;
b. 在细菌,真菌以及真核细胞中检测时,所研究的蛋白处于天然环境中,并且能直观报道蛋白相互作用在细胞中的定位研究;
c. BiFC技术耗时较短;
d. BiFC技术还可以用于研究蛋白之间的弱相互作用或瞬间相互作用。
 
二、服务内容
(1)BIFC双分子荧光互补载体构建;
(2)根癌农杆菌转化;
(3)农杆菌菌液注射烟草叶片;
(4)激光共聚焦显微镜拍照。
 
三、结果展示

 
 

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