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技术服务

染色质免疫沉淀ChIP-seq


ChIP

一、技术介绍:
染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)是目前研究体内DNA与蛋白质相互作用最为主要的方法之一。该技术在活细胞状态下,通过交联剂交联固定细胞内的“蛋白-DNA”复合物,裂解并超声处理细胞,将染色质随机打断成一定长度范围内的小片段,用目的蛋白特异的抗体(或标签抗体)做免疫沉淀,获取“目的蛋白-DNA”的复合物。去交联分离复合物中的DNA,结合第二代测序技术或qRT-PCR检测,能够高效地在全基因组范围内检测与组蛋白、转录因子等互作的DNA区段,最终获得蛋白质与DNA相互作用的信息。
染色质免疫共沉淀技术广泛的应用于表观遗传(组蛋白等)分析,转录因子结合位点分析等蛋白质与DNA结合的实验分析中。
 
 
二、服务内容:
1. ChIP-Seq:随着第二代测序技术的逐步完善和成熟,染色质免疫共沉淀结合第二代高通量测序技术(ChP-seq)正逐步成为基因调控网络研究中一种非常有效的研究手段。可在全基因组范围对蛋白结合位点进行筛选与鉴定;每个样本可获得数百万条的序列标签,可发现研究基因组上稀有的蛋白结合位点;获得高水平的信噪比数据,准确区分真实事件与噪音,精确定位蛋白结合位点。
2. ChIP-qPCR:ChIP-qPCR完美结合了ChIP技术和实时定量PCR技术,能够特异,灵敏,快速地定量生物样品中特定转录因子/组蛋白修饰与已知基因启动子的结合。常用于特定蛋白和DNA序列的体内互作验证。

 

三、样品要求:

 

材料种类样品需求最少需求量运输寄送方式
组蛋白转录因子
培养细胞离心收集细胞10^610^7多聚甲醛固定后,液氮速冻,干冰寄送
动物组织新鲜组织,无血管、结缔组织等杂质50mg100mg液氮速冻,干冰寄送
植物组织新鲜幼嫩组织,取材后尽量剪碎5g8g取材后液氮速冻,干冰寄送

 

四、结果展示:
 

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